2003年6月至2003年8月出演电视剧《丝路豪侠》饰演玛瑙;9月至11月出演电视剧《夏日里的春天》饰演李春天;2003年11月至2004年1月出演《爱在有情天》饰演孙秀冬。
2004年出演电视剧《我的功夫女友》饰演姚开心;3月至6月出演电视剧《后海前街》饰演文新。
2005年出演电视剧《
碧血剑》饰演安小慧;电视剧《
大冒险家》饰演尤然;及电影《
群英会》饰演青莲、《
东江特遣队》饰演林亚珍、《天上掉馅饼》里饰演宝儿。
2006年出演电视剧《吴越钱王》饰演甄珠凤及电影《
但愿人长久》在2月17日在澳大利亚拜伦电影节上,获得了最佳影片、最佳剧情两项大奖的殊荣。
2007年出演电视剧《清风明月佳人》饰演李师师,零片酬儿童公益慈善电影《缘来是爱》合作演员有黄圣依、杨恭如、郑昊。
2008年出演电视剧《善良背后》合作演员保剑锋、陈紫函,出演电影《
铁人》尹力导演作品,合作演员有白静、刘烨、黄渤。
2009年出演电视剧《瑞莲》剧中马苏饰演的女一号瑞莲与杨紫茳饰演的男一号万锦洪是青梅竹马,但老爷因门户之见设计拆散,并将瑞莲嫁给了丧妻渔户陈四祥,万锦洪则到香港发展。
2010年8月14日其主演由汪俊执导的电视剧《我的美丽人生》在央视一套热播,其扮演的“小保姆”王小早深受观众喜欢,演技受肯定。11月2日在电视剧《大西南剿匪记》中首次挑战“女土匪”形象,再次颠覆性的完成了人物塑造,深受业内外的普遍关注。同年,凭借在《铁人》中的出色表现,获得第19届金鸡百花电影节最佳女配角提名。
2011年4月23日与王志文、李幼斌担纲主演的电视剧《
旗袍》上星热播,这是马苏首次出演谍战剧,剧中扮演的关萍露是一位游走于地下党与特务机关的秘密情报人员。年底,马苏凭借在《旗袍》中的出色表现,获得了华鼎奖“革命题材最佳女演员”奖等多个奖项。
2012年主演由赵宝刚导演的电视剧《北京青年》剧中扮演“大嫂”权筝,虽然不十分出彩,但却像个秤砣,能平衡大家之间的关系,及古装武侠剧《
新白发魔女传》饰演女一号“白发魔女”的马苏与男友孔令辉的分手传闻也是漫天飞。9月8日,第二十六届中国电视金鹰奖颁奖盛典,凭借在《厂花》中的出色表现,获得”观众最喜爱的女演员“奖。
2013年出演电视剧《三十岁,你好》剧中,马苏扮演的罗花儿与杜淳扮演的佟又一是一对80后情侣。
2013年4月24日,2013年福布斯中国名人榜出炉,马苏排在福布斯名人榜46位,年收入3040万元,收入排名为49位。12月26号,第29届中国电视剧飞天奖颁奖盛典,在中央电视台新址演播大厅隆重举行,马苏因为饰演“厂花白玉萍”,继荣获金鹰奖优秀女演员奖之后,再次获得飞天奖优秀女演员奖称号。
2014年5月4日,2014年福布斯中国名人榜出炉,马苏排在福布斯名人榜76位,年收入1850万元,收入排名75位。7月7日,由马苏、沙溢主演的轻喜剧《
结婚前规则》在北京举行发布会,7月11日卫视首播。多伦多时间9月7日,《
心花路放》导演宁浩带领马苏、周冬雨参加多伦多国际电影节,经过16日,21日,27日三场点映后,于9月30日全国公映的电影《心花路放》票房于10月16日破10亿。10月23日获得第十届全国十佳电视制片“十佳电视剧演员”奖。11月4日凭借在《心花路放》的出色表现获得第十届中美电影节“最佳女配角”奖。12月1日、3日,由马苏、李光洁主演的电视剧《
团圆饭》分别在上海、北京举行发布会,12月6日卫视首播。12月7日再度凭借在《心花路放》中以颠覆性的演出获得第二届伦敦国际华语电影节“最佳女配角”奖。
2015年2月16日春晚最后一次彩排前夕,四小花旦秦岚、佟丽娅、马苏、王丽坤扮演中国古代四大美女的节目《国色天香》也退出春晚。3月4日,在中央电视台元宵晚会上,表演舞蹈《国色天香》。3月28日,马苏主演的《天使的城》在浙江卫视、江苏卫视联合播出。同时客串的电影《
何以笙箫默》于4月30日上映。5月11日,福布斯中文版推出2015年中国福布斯榜,马苏综合排名84位。8月1日,参与的真人秀《十二道锋味第二季》在浙江卫视播出。8月5日,电视剧《秀才遇到兵》在江苏卫视、北京卫视黄金时间联合播出。